Laboratoire d'Analyses
Médicales AGDAL

Protocoles de Recueil des Prélèvements

I- Etat de Jeûne :

L'état de jeûne est un des éléments permettant la bonne exécution technique des analyses et une interprétation pertinente des résultats.
L'état de jeûne strict se définit par un délai de 12 heures entre le dernier repas et la prise de sang. Il est possible de boire un verre d’eau, il est recommandé de prendre un repas léger la veille au soir.
Le laboratoire préconise d'être à jeun pour une prise de sang parce que :
• Certains dosages varient après le repas, l'alimentation apporte elle-même certains éléments dosés (ex : triglycérides, glucose…).
• Après un repas la qualité du sérum ou du plasma est modifiée (trouble, viscosité) qui peuvent interférer avec certains dosages
Le Laboratoire recommande une période de jeûne strict pour les analyses suivantes:

  • CHOLESTEROL
  • CHOLESTEROL HDL
  • CHOLESTEROL LDL
  • Triglycérides
  • Glycémie à jeun
  • Acide folique,
  • GASTRINE (ne rien absorber),
  • IgE multi allergènes
  • Test respiratoire à l’urée
  • cortisol

II- Prélèvement :

Le prélèvement est réalisé par du personnel compétent et autorisé: infirmier (ère), technicien(ne) ou biologiste, en respectant les règles de sécurité pour le patient et pour le personnel.

  • Prélèvement sanguin destiné aux adultes, enfants, nourrissons et nouveau né
  • • Prélèvements à visée bactériologique et/ou mycologique : prélèvements cutanés, vaginaux, urétraux, ORL, pus, ….
  • Le personnel chargé de prélèvement :

    - Demande une confirmation de l’identité : Nom et prénom
    - Demande les renseignements cliniques complémentaires (Pathologies, traitements en cours, posologie, voyages à l'étranger, …)

  • Le patient pourra demander à être allongé et poser les questions nécessaires à la compréhension de l'acte et de la prescription.
  • Le personnel doit répondre dans la limite de ses connaissances. Il ne dispose pas, en outre, des éléments cliniques et para-cliniques du patient, contrairement au Médecin qui a établi la prescription en connaissance de la globalité de dossier patient.

III- Tests de tolérance au glucose:

1- Test O'SULLIVAN:

- prise de sang chez une femme enceinte à jeun.
- Lui faire absorber une solution de 50 g de glucose.
- On pratique une seconde prise de sang après 60 min.

2- Protocole d'une hyperglycémie provoquée par voie orale:

Ces protocoles " standard " peuvent quelque fois être simplifiés ou au contraire complétés
pour répondre à certaines prescriptions. :
Le sujet doit être à jeun depuis la veille au soir.
Première prise de sang à jeun
Lui faire absorber par voie orale la solution de glucose préparée par le laboratoire (75g de glucose pour l’adulte et pour la femme enceinte ou 1,75g/Kg pour l’enfant).

  • prise de sang après 60 min
  • prise de sang après 120 min

NB : Il est impératif que le patient absorbe la totalité de la solution de glucose et surtout qu’il n’ingère plus rien jusqu’à la fin de l’épreuve.

IV- Prélévements urinaires:

1- Urines de 24h:
Protocole impératif de recueil pour les urines de 24 heures:
Le premier jour, au lever, éliminer toutes vos urines dans les toilettes et noter l’heure exacte.
Pendant les 24 heures suivantes (journée et nuit), recueillir toutes vos urines dans le flacon fourni par le laboratoire, compris une dernière fois le lendemain matin à la même heure, Apporter le flacon rapidement au laboratoire.
NB: Si le protocole ci-dessus n'était pas respecté dans son intégralité, en particulier au niveau des heures et des volumes de recueil des mictions, veuillez le signaler au laboratoire.
Nom de la photo
2- Etude cytobactériologique des urines (ECBU) :
Chez l'homme :
  • Lavage soigneux des mains.
  • Désinfection du méat urinaire avec coton ou compresse imprégné d’une solution désinfectante de Dakin ou à défaut avec du savon de Marseille.
  • Tout en évitant tout contact avec la peau, recueillir les urines au milieu de la miction, rejeter le 1er jet, recueillir le 2ème jet dans un flacon stérile et la fin de la miction dans les toilettes.
Chez la femme:
  • Lavage soigneux des mains
  • Désinfection du méat urinaire et de l’ensemble de la région périnéale avec du papier coton ou compresse imprégnée d’une solution désinfectante de Dakin ou à défaut avec du savon de Marseille toujours d'avant en arrière.
  • Tout en maintenant les grandes lèvres écartées et en évitant tout contact avec la peau, recueillir les urines au milieu de la miction : rejet du 1er jet, recueil du 2ème jet dans un flacon stérile et terminer la miction dans les toilettes.
Protocole spécial pour pédiatrie:
  • Le recueil s'effectue à l'aide d'une poche autocollante stérile, après désinfection du méat urinaire, du périnée et de la peau.
  • Se laver les mains (lavage simple).
  • Bien désinfecter les parties génitales à l'aide des lingettes imbibées d'antiseptique en évitant de toucher avec ses doigts: pour les filles: d'avant en arrière sans revenir sur le geste; pour les garçons: décalotter avec précaution si possible et bien insister au niveau du méat.
  • Ouvrir la poche stérile.
  • Bien coller la poche pour éviter les fuites.
  • La poche ne doit pas être laissée en place plus d’une heure pour éviter au maximum le risque de contamination.
  • Introduire la poche dans le flacon stérile (sans transvaser) et le refermer immédiatement puis le faire parvenir le plus rapidement possible au laboratoire .
3- COMPTE D'ADDIS:
Protocole impératif de recueil pour le "compte d'ADDIS" (H.L.M):
Cet examen se pratique pendant une période de 3 heures, en position allongée et donc le plus souvent pendant les 3 heures qui précèdent l’heure habituelle de se lever.
3 heures avant le lever (utiliser éventuellement un réveil!), éliminer la totalité de vos urines dans les W.C. et retenir l’heure exacte.
Boire 2 verres d’eau (1/4 de litre minimum). Se recoucher et rester allongé, au repos et à jeun. 3 heures exactement après l’heure retenue, recueillir la totalité des urines de 3 heures dans le flacon et l’apporter rapidement au laboratoire.
Si vous deviez uriner avant la fin des 3 heures, recueillez ces urines également dans le flacon.
4- Recherche du BK dans les urines :
-Recueil de la totalité des urines émise la nuit et lors de la 1ere miction matinale sous restriction hydrique.
-Recueil des urines selon les préconisations d’un ECBU standard .
-Répéter la recherche 3 jours de suite ou selon la prescription du médecin.
-Le prélèvement doit arriver au laboratoire dans un délai ne dépassant pas 2h, à température ambiante.

V- Prélèvements génitaux:

1- Spermogramme:
Protocole impératif de recueil du sperme:
Le recueil doit être effectué au laboratoire le matin avant 12 h (le transport du sperme altère la mobilité et la vitalité des spermatozoïdes).
Respecter, avant le recueil, une abstinence d'au moins 3 jours et de moins de 5 jours (pas de rapports pendant les 3 à 5 jours précédents).
Uriner avant de réaliser le recueil, se laver les mains et la verge avec une Solution hydro-alcoolique, se rincer les mains et la verge, se nettoyer les mains à Solution hydro-alcoolique, puis effectuer le recueil par masturbation dans le flacon stérile fourni par le laboratoire.
Le recueil ne peut se faire à domicile qu’après l’accord du médecin prescripteur, dans ce cas il faut apporter le flacon rapidement au laboratoire (moins de 30 min de délai) sans lui faire subir des variations importantes de température (pas de passage au réfrigérateur…).
NB: un protocole de recueil non suivi rigoureusement risque de nuire considérablement à la qualité de vos examens et d’induire une interprétation erronée.
2- Spermoculture:
  • - L’abstinence n’est pas exigée
  • - Uriner avant de réaliser le recueil.
  • - Se laver les mains et la verge avec du savon, se rincer les mains et la verge, se nettoyer les mains avec une Solution hydro-alcoolique.
  • Effectuer le recueil par masturbation dans le flacon stérile fourni par le laboratoire.
3- Prélèvement Urétral:
Le prélèvement est effectué au laboratoire par la biologiste (Prendre Rendez-vous), en dehors de tout traitement antibiotique, sinon prévoir une fenêtre thérapeutique de 48h à 72h.
Il est recommandé de ne pas uriner pendant les 4h précédant l’examen et de ne pas faire de toilette intime.
Les secrétions génitales sont prélevées à l’aide de deux écouvillons fins à tige métallique.
Pour favoriser l’écoulement faire un massage de l’urètre s’il n’existe que peu ou pas d’écoulement.
Le préleveur enfonce l’écouvillon humidifié de 0.5 à 1cm, le tourne une fois puis le retire délicatement.
4- Prélèvement vaginal:

    L’analyse se fait :

  • Sans toilette locale (absence de toilette vaginale pendant les 12 heures précédant le prélèvement).
  • A distance des rapports sexuels (si possible > 48 heures), sauf urgence médicale.
  • la patiente est installée sur le fauteuil en position gynécologique.
  • un spéculum stérile est placé dans le vagin de sorte que le col de l’utérus soit visible.
  • A l’aide d’un écouvillon, on prélève les sécrétions au niveau du cul de sac postérieur.
  • Avec un nouvel écouvillon on prélève les sécrétions au niveau de l’endocol en faisant de petites rotations à 360 degrés.
5- Prélèvement vulvaire:

    L’analyse se fait :

  • En dehors des périodes menstruelles.
  • Sans toilette locale
  • La patiente est installée en position gynécologique.
  • On écarte les grandes lèvres délicatement.
  • On Pose le bout de l’écouvillon stérile sur la vulve, on fait quelques rotations afin de prélever les sécrétions.
6- Prélèvement cervico-vaginal (FCV):
  • On Recueille un échantillon cellulaire du col de l’utérus en introduisant la partie centrale d’une brosse dans le canal endocervical, afin que les poils latéraux entrent en contact avec l’exocol, on tourne la brosse (3 tours au moins).
  • On décharge la brosse dans le flacon contenant la solution de conservation.
  • On visse le bouchon à fond
  • Le prélèvement sera transmis au laboratoire d’Anatomo-pathologie

VI- Expectorations et secrétions broncho-pulmonaires :

1- Etude cytobactériologique d’un crachat:
  • Se fait le matin au réveil
  • Faire un lavage des dents et un rinçage abondant de la bouche (en cas de besoin, effectuer un bain de bouche).
  • Prélever les expectorations obtenues après des efforts de toux.
  • Recueillir des expectorations dans un flacon stérile.
  • le prélèvement doit se faire de préférence au laboratoire.
2 - Prélèvement de gorge:
C’est une technique qui consiste à prélever les secrétions pharyngées en vue d’un examen bactériologique.
-Le prélèvement doit se faire loin des repas, de préférence à jeun.
- Il doit être fait avant toute antibiothérapie.
- Eviter les bains de bouche et les badigeonnages avant le prélèvement.
- Le patient doit ouvrir la bouche et prononcer la lettre « A »,
- On immobilise la langue avec l’abaisse langue.
- On Prélève les secrétions avec un écouvillon.
- On Retire l’écouvillon sans toucher à la paroi interne de la bouche.

VII- Prélèvement d’un pus:

  • Il doit être fait avant toute antibiothérapie
  • Le prélèvement s’effectue par écouvillonnage de la plaie en évitant tout raclage de surface.
  • Si le pus est en profondeur, on peut prélever à la seringue avec une aiguille.

VIII- Prélèvement mycologique :

Se fait avant la mise en route de tout traitement antifongique, respecter un délai de 3 semaines si le patient a appliqué un antifongique local et 3 mois s’il a appliqué une solution filmogène sur les angles ou s’il a pris de la Terfinaline.
Le jour de l’examen, le patient doit faire sa toilette avec un savon neutre.
La technique de prélèvement dépend de l’aspect clinique des lésions et de leur siège :
- Les lésions squameuses ou squamo-croûteuses des plis, de la peau glabre sont prélevées par grattage au niveau de la zone.
- Mycose de l’ongle : Le prélèvement s’effectue par grattage du matériel friable du lit de l’ongle après coupage de la tablette jusqu'à cette zone.

IX- Prélèvements des selles:

1- Parasitologie des selles:
Cet examen se base sur l’examen de la selle du patient recueilli dans un pot stérile et analysée au laboratoire.
- Si le recueil doit se faire à domicile, le flacon doit être acheminé au laboratoire dans les plus brefs délais, à température ambiante.
2- Coproculture:
Cet examen est à effectuer, si possible, lors des épisodes diarrhéiques
- Recueillir des selles fraîches dans le flacon stérile
- Si le recueil doit se faire à domicile, les selles doivent être apportées rapidement au laboratoire. Si c'est impossible, conserver les selles au réfrigérateur 12 heures maximum. Si la parasitologie des selles est demandée conserver l'échantillon à température ambiante.
- Noter la date et l’heure du recueil
- Préciser à l’accueil : fièvre, voyages récents ou déplacements professionnels, vie en crèche pour les enfants, restauration …
3- SCOTCH-TEST anal:
Test de Graham pour recherche d'oxyures:
- Le patient doit se présenter au laboratoire le matin, avant la toilette. Un morceau de Scotch adhésif transparent sera collé au niveau de la marge anale.
- Ensuite le Scotch est mis à plat sur la lame de verre.

X- Autres prélèvements cutanés:

1- SCOTCH TEST Cutané:
Il permet le diagnostic de Pityriasis versicolor lié à Malassezia. Les lésions se localisent sur les zones séborrhéiques : haut du thorax, dos, épaules, bras, pouvant s'étendre au cou, au bas du tronc et aux cuisses. Le grattage à la curette fait détacher les squames.
2- Prélèvement de leishmaniose cutanée:
Le plus souvent, lésions ulcéreuses (formes sèches ou humides) :
- On enlève la croûte
- On racle la face interne de l'ulcération sur sa périphérie avec un vaccinostyle
- le suc dermique obtenu est étalé sur une lame en un frottis mince.
3- Intradermo-réaction (IDR) :
L’intradermoréaction à la tuberculine est un test cutané qui explore l’hypersensibilité de type retardée induite par l’injection des composants antigéniques de Mycobactérium tuberculosis. La source antigénique utilisée est la tuberculine.
Déroulement de test:
- Désinfection de la peau à l’alcool
- Injection de 0.1 ml de la solution tuberculine à l’aide d’une seringue à insuline à la face antérieure de l’avant-bras (injection en intradermique).
Lecture de résultats:
La lecture s’effectue idéalement à 72 heures après l'injection de tuberculine, la peau est inspectée. La réaction est dite positive si une zone rouge enflée apparaît. En fonction de la taille de l'induration, on peut déterminer si le patient est infecté :

XI- Test respiratoire à l’urée :

1- Intérêt:
Ce test consiste à analyser l’air expiré afin de détecter la présence ou l’absence dans l’estomac d’une bactérie nommée Helicobacter pylori. Cette bactérie est responsable de nombreuses pathologies gastriques qui se traduisent généralement par des douleurs gastriques.
2- Préconisation pour le prélèvement:
Ce test doit être réalisé:
  • 1 mois après l’arrêt de toute antibiothérapie.
  • 15 jours au moins après l’arrêt des antisécrétoires (antagonistes des récepteurs H2 et inhibiteurs de la pompe à protons).
  • Après arrêt des traitements anti-acide et des pansements gastro intestinaux depuis 24 heures. En effet ces traitements interférents sur la présence d’Helicobacter pylori pouvant rendre le test faussement négatif.
  • A jeun, sans avoir fumé, sans avoir bu ni mangé.
Le jour du prélèvement :
Se présenter strictement à jeun (ni boisson, ni aliments) sans avoir fumé depuis 6 heures. Si les consignes n’ont pas été respectées, il est préférable de reporter le test
Il faudra environ 40 minutes pour la réalisation du prélèvement.
3- Protocole de prélèvement:
Etape 1 :
On fait boire au patient une solution d’acide citrique, Attendre 10 minutes.
Etape 2 :
Prélever les échantillons dans des tubes avant-dose:
  • Prendre une paille et les 2 tubes identifiés « BASAL »
  • Déboucher le tube et plonger la paille dans le tube
  • Demander au patient d’expirer au fond du tube a l’aide de la paille jusqu’à ce qu’une condensation apparaisse au fond du tube
Répéter l’opération avec le 2éme tube BASAL.
Etape 3 :
Dissoudre le comprimé d’urée marquée « TAUKIT » dans 125 ml d’eau et faire boire au patient la solution.
(Enfant : dissoudre un demi-comprimé dans 50 ml d’eau)
Etape 4 :
Le patient devra rester allongé pendant 30 minutes.
Etape 5 :
Prélever les échantillons dans les tubes après-dose.
On recueille à nouveau des échantillons d’aire expiré dans les tubes « POST » en suivant le même protocole (étape 2).
Etape 6 :
Identifier les échantillons, fermer le kit.

XII- Test antigénique COVID-19:

Risque de contamination potentielle COVID 19
  • Porter une sur-blouse jetable, des gants, un masque FFP2 et des lunettes ou un écran facial.
  • Pour les prélèvements à domicile : une seule personne vaccinée et informée des risques qui est autorisée à aller faire les prélèvements à domicile.
Nom de la photo

XIII- Le temps de saignement :

1- Principe:
Ce test consiste à mesurer le temps nécessaire à l’arrêt du saignement après incision superficielle de la peau du patient.
2- Méthode:
  • On nettoie le lobe de l’oreille à l’alcool.
  • On fait une piqûre à l’aide d’une aiguille propre au test.
  • Dès l’apparition de la première goutte de sang, on déclenche le chronomètre.
  • Toutes les 30 secondes, on recueille les gouttes de sang sur une feuille de papier buvard sans toucher la piqûre.
  • On arrête le chronomètre dès que le sang cesse de couler.
  • On note le temps de saignement.